Enzymes kadhaa zinazotumiwa sana katika majaribio ya PCR

Mmenyuko wa mnyororo wa polymerase, iliyofupishwa kamaPCRkwa Kiingereza, ni mbinu ya baiolojia ya molekuli inayotumiwa kukuza vipande maalum vya DNA.Inaweza kuzingatiwa kama nakala maalum ya DNA nje ya mwili, ambayo inaweza kuongeza kiasi kidogo sana cha DNA.Wakati wotePCRmchakato wa mmenyuko, darasa moja la vitu lina jukumu muhimu - enzymes.

1. Taq DNA

Katika majaribio katika siku za mwanzo zaPCR, wanasayansi walitumia Escherichia coli DNA polymerase I, Lakini kuna tatizo na enzyme hii: inahitaji kujaza enzyme mpya kila wakati mzunguko unafanywa, ambayo inafanya hatua za operesheni kuwa ngumu kidogo na ni vigumu kuimarisha kikamilifu moja kwa moja.Tatizo hili lilitatuliwa baada ya wanasayansi kutenga kwa bahati mbaya Taq DNA polymerase kutoka Thermus aquaticus mwaka wa 1988. Tangu wakati huo, ukuzaji wa moja kwa moja wa DNA umekuwa ukweli.Ugunduzi wa enzyme hii pia hufanyaPCRteknolojia rahisi, ya vitendo na ya ulimwengu wote.Hivi sasa, polimerasi ya Taq DNA ndiyo polima ya kawaida zaidi katika vifaa vya DNA.

2. PfuDNA

Kama ilivyoelezwa hapo juu, Taq DNase ina mdudu mkubwa, kwa hivyo wanasayansi wamerekebisha polima ya Taq DNA kwa kiwango fulani ili kuzuia ukuzaji usio maalum kwa sababu ya kutolingana, na kusababisha matokeo ya mtihani yasiyo sahihi.Lakini urekebishaji wa Taq DNA polymerase unaweza kuzuia shughuli ya DNA polymerase kwenye joto la kawaida.PfuDNA polymerase inaweza kufidia hasara zilizo hapo juu za Taq DNA polymerase, ili mmenyuko wa PCR ufanyike kawaida, na kiwango cha mafanikio cha upanuzi wa jeni lengwa kinaweza kuboreshwa kwa ufanisi.

3. Reverse Transcriptase

Reverse transcriptase iligunduliwa mwaka wa 1970. Kimeng'enya hiki hutumia RNA kama kiolezo, dNTP kama substrate, hufuata kanuni ya kuoanisha msingi, na kuunganisha uzi mmoja wa DNA unaosaidiana na kiolezo cha RNA katika mwelekeo wa 5'-3′.Reverse transcriptase inategemea kimsingi shughuli ya DNA polymerase kutoka kwa violezo vya DNA au RNA na kwa hivyo haina shughuli ya 3′-5′ exonuclease.Hata hivyo, ina shughuli ya RNase H, ambayo huweka kikomo cha urefu wa usanisi wa nakala ya kinyume kwa kiwango fulani.Kwa sababu ya uaminifu mdogo na uwezo wa kustahimili joto wa wild reverse transcriptase, wanasayansi pia waliirekebisha.

KwaPCRmajaribio, matumizi kuu ni:tube ya PCR ya mtu binafsi, bomba la PCR 4/8, sahani za PCR.

LabioPCR za matumizikuwa na yafuatayofaida:

Sahani za PCR: Utangamano mpana wa mzunguko wa joto;Utambulisho wa hali ya juu, rahisi wa kisima;vizuri fluorescence kutafakari; nzuriuhamisho wa joto;DNase iliyoidhinishwa, RNase, DNA, vizuizi vya PCR, na iliyojaribiwa bila pyrojeni.

Mirija ya PCR ya mtu binafsi: Inastahimili uvukizi; nzuriuhamisho wa joto;uwazi bora wa macho; DNase iliyoidhinishwa, RNase, DNA, vizuizi vya PCR, na iliyojaribiwa bila pyrojeni.

4/8-strips PCR zilizopo: Kuta nyembamba sana;uwazi wa juu;akisi nzuri ya umeme;inaweza kutumika katika tasnia ya dawa, tasnia ya chakula, na baiolojia ya molekuli; nyenzo za PP za ubora wa juu, bikira;DNase Iliyoidhinishwa, RNase, DNA, vizuizi vya PCR, na isiyo na pyrogen iliyojaribiwa.